Topmusicanswers
- Waarom is er geen versterking in PCR?
- Waarom is mijn DNA niet versterkt??
- Wat gebeurt er als er geen primers worden toegevoegd aan PCR?
- Hoe repareer je niet-specifieke amplificatie in PCR?
Waarom is er geen versterking in PCR?
Onvoldoende versterking kan het gevolg zijn als de aanvankelijke hoeveelheid sjabloon te laag is. Verhoog het aantal amplificatiecycli in stappen van 5, of, indien mogelijk, verhoog de hoeveelheid template. Verontreinigingen in de dNTP-mix kunnen leiden tot onvolledige of onjuiste amplificatie of PCR-remming. Gebruik dNTP's van hoge kwaliteit.
Waarom is mijn DNA niet versterkt??
1) je hebt misschien een slecht primerontwerp of reactiestandaardisatie (Dus, evalueer je primerontwerp en doe, zoals anderen al zeiden, een gradiënt-PCR om verschillende uitgloeitemperaturen te evalueren); 2) Geen DNA (uw extractieprotocol is mogelijk mislukt) en dus kunnen uw primers alleen aan elkaar (of onder elkaar) hechten.
Wat gebeurt er als er geen primers worden toegevoegd aan PCR?
Vraag: Als u bent vergeten de primers aan uw PCR-reactie toe te voegen, wat zou er dan gebeuren en waarom?? 1. Je reactie zou mislukken omdat Taq-polymerase geen basen kan toevoegen zonder dat er al een klein stukje DNA aanwezig is. ... Je reactie zou mislukken omdat er geen enzym zou zijn dat nieuwe nucleotidebasen zou kunnen toevoegen.
Hoe repareer je niet-specifieke amplificatie in PCR?
Gebruik minder cycli wanneer de sjabloonconcentratie hoog is en gebruik meer cycli wanneer de sjabloonconcentratie laag is. 2. Verlengingstijd was te lang: overmatige verlengingstijd kan niet-specifieke versterking mogelijk maken. Gebruik in het algemeen een verlengingstijd van 1 min/kb.
