Problemen met pcr oplossen

Pas de gloeitemperaturen aan, aangezien hoge concentraties PCR-additieven of co-oplosmiddelen de binding van de primer aan het doel verzwakken. Verhoog de hoeveelheid DNA-polymerase of gebruik DNA-polymerasen met een hoge processiviteit.
...

1. Volgordefouten aan de uiteinden van PCR-producten.
2. Vals-positieve versterking.
3. Bronnen.

1. Wat zijn de algemene probleemoplossing die kan optreden in PCR?
2. Waarom werkt mijn PCR niet??
3. Wat veroorzaakt PCR-smering??
4. Wat gebeurt er als de gloeitemperatuur te hoog is??

Wat zijn de algemene probleemoplossing die kan optreden in PCR?

Gids voor het oplossen van problemen met PCR

Waarom werkt mijn PCR niet??

Het vergeten van slechts één component van de PCR-reactie, of dat nu de DNA-polymerase, primers of zelfs het sjabloon-DNA is, zal resulteren in een mislukte reactie. De eenvoudigste oplossing is om de reactie te herhalen. ... Als er hierna nog steeds geen PCR-product is, is de kans groot dat iets anders uw reactie belemmert.

Wat veroorzaakt PCR-smering??

DNA-besmetting, RNA in DNA-monster, hoge DNA-concentratie in de PCR-reactie kan uitsmeren veroorzaken. ... DNA-uitsmering wordt meestal in planten veroorzaakt door een hoge concentratie van template-DNA.

Wat gebeurt er als de gloeitemperatuur te hoog is??

Onthardingstemperatuur was te hoog

Als de gloeitemperatuur te hoog is, kunnen primers niet binden aan de template. De vuistregel is om een ​​gloeitemperatuur te gebruiken die 5°C lager is dan de T_m van de primer.